高压蒸汽灭菌法是可杀灭包括芽胞在内的所有微生物的一种灭菌方法，是灭菌效果中最好的。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。
基本介绍 方法是将需灭菌的物品放在高压锅（autoclave）内，加热时蒸汽不外溢，高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽压下，温度达到121.3℃。
灭菌器分类
有下排式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器两大类。
下排式压力蒸汽灭菌器又包括手提式和卧式两种。
（1）下排气压力蒸汽灭菌器，下部有排气孔，灭菌时利用冷热空气的比重差异，借助容器上部的蒸汽压迫使冷空气自底部排气孔排出。灭菌所需的温度、压力和时间根据灭菌器类型、物品性质、包装大小而有所差别。当压力在102.97～137.30kPa时，温度可达121～126℃，15～30分钟可达到灭菌目的。
（2）预真空压力蒸汽灭菌器，配有真空泵，在通入蒸汽前先将内部抽成真空，形成负压，以利蒸汽穿透。在压力205.8kPa时，温度达132~134℃，4min即可灭菌。
注意事项
（1）灭菌包不宜过大过紧（体积不应大于30cm×30cm×30cm），灭菌器内物品的放置总量不应超过灭菌器柜室容积的85%。各包之间留有空隙，以便于蒸汽流通、渗入包裹中央，排气时蒸汽迅速排出，保持物品干燥。
（2）盛装物品的容器应有孔，若无孔，应将容器盖打开。
（3）布类物品放在金属、搪瓷类物品之上。
（4）被灭菌物品应待干燥后才能取出备用。
（5）灭菌锅密闭前，应将冷空气充分排空。
（6）随时观察压力及温度情况。
（7）注意安全操作，每次灭菌前，应检查灭菌器是否处于良好的工作状态。
（8）灭菌完毕后减压不要过猛，压力表回归“0”位后才可打开盖或门。
